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Y迷宫实验
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Y迷宫实验

实验方法原理 通过灯光和电刺激,使动物形成回避条件反射,观察和记录动物的回避条件反应能力和空间辨别能力。分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。

实验材料 大鼠 小鼠

仪器、耗材 Y-迷宫由三等分辐射式迷路箱   控制仪

实验步骤

一、方法

1. 筛(预)选

(1)将大鼠放入Y-迷宫箱中适应3~5 min后,给予适当电击至其对3臂均探索进入为止。选择活跃,对电击反应较敏感,逃避反应迅速者供测试用。淘汰反应过于迟钝或特别敏感的大鼠。

(2)预选出达到电击次数≤3次时连续2次正确反应的动物,即对电击反应较敏感的大鼠供实验用。

(3)在上述初步筛选的基础上,通过正式迷宫训练,淘汰达不到学会标准(学不会)的大鼠。

2. 正误判定的标准

大鼠受电击后从起步区直接逃到安全区或通电后10s内一次性跑向安全区为“正确反应”,若逃到无灯光的任何另一臂,则记为错误反应。

3. 达标(学会)标准

(1)连续10次中有9次或以上正确反应(正确反应率≥90%)定为学会标准。

(2)每个实验日进行20次训练测试,错误反应次数(errors number EN)≤2次。全天总反应时间(total reaction time TRT)≤120s作为判定大鼠学会的标准。因为EN反映大鼠反应的正确程度,TRT反映大鼠反应时间的长短,可综合评价大鼠的学习记忆能力,因而此标准更为合理。

以上为每只大鼠达标(学会)标准,全组大鼠达标(学会)标准为全组正确率(学会动物数/该组动物总数×100%)达85% 以上。

4. 学习测试

实验时先将大鼠放入迷宫中适应3~5 min,然后再开始正式实验。

(1)随机休息法:安全区以无规则次序变换,以训练大鼠辨别灯光刺激及安全方位的能力,大鼠受电击后逃到安全区后,灯光继续作用10~15s,熄灯后结束一次测试,大鼠所在支臂就作为下一次测试的起点,两次测试时间间隔为30s或休息1 min 后再予以第2次测试,依次重复,测试至达连续9/10标准。

(2)随机不休息法:安全区以无规则的次序变换开始时,对大白鼠所在支臂与另一支臂通电,动物在电击下逃窜至灯光区后再保持l0s或30s为一次测试。然后动物所在支臂为下次测试的起始位置进行下一次测试。

(3)顺序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂轮流作为起步区或安全区。

以上方法还可以分为两类:①每天固定训练次数,一般是20次,连续训练3~4 d。大鼠一般都能达到学会标准。②不固定训练次数,采用分段连续训练法,即每训练10次,休息1 min,连续训练直到学会为止,训练在1 d内完成。一般多采用第一种方法。

5. 记忆保持(再现)测试

学习测试24 h、48 h、1周、30 d后,再以同样方法测试至9/10标准,正确反应次数定为A,以A/10表示记忆的保持能力,此值越高说明记忆力越好。

二、观察指标

1. 达标所需的训练次数(电击次数、反应次数、测试次数):用动物学习达到学会标准前所需的测试数,表示其空间分辩反应的学习记忆成绩。

2. 达标所需的天(日)数:记录每只大鼠达到学会标准所用的日数。

3. 错误反应次数(errors number EN ):一个实验日完成所有反应中错误反应的次数。

4. 全天总反应时间(total reaction time TRT):动物的反应时(潜伏期)指从信号灯亮开始至大鼠第1次逃至灯亮区为止所耗的时间,全天总反应时是一个实验日(全天)完成所有反应(包括正确反应和错误反应)所需时间。

5. 主动回避率:大鼠在灯亮后但未通电的5s内完成逃避反应的次数占总反应次数的百分率。安全区灯亮,电刺激尚未开始时,大鼠即逃往安全区表明大鼠已经形成了明暗辨别条件反射(主动回避反应)。

6. 正确反应率(行为正确率):正确反应数占总测试数的百分比。

7. 全组正确率:学会动物数占该组动物总数的百分比。

8. 3d学会率:训练第3d达学会标准的动物数占该组动物总数的百分比。动物数占该组动物总数的百分比。



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