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细胞凋亡检测
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细胞凋亡检测
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细胞凋亡检测

一、细胞凋亡检测

通过带荧光标记的Annexin V检测各个样品的凋亡情况

二、原理

细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。Annexin V是一种易于结合到磷脂类如PS的蛋白,可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此,可建立一种用Annexin V结合在细胞膜表面作为凋亡的指示并结合一种染料(如PI、DAPI、7-AAD等)排除试验以检测细胞膜的完整性的检测方法。

三、细胞凋亡服务流程

  收集细胞,洗涤、悬浮细胞;

  加Annexin V-EGFP(或其它)及PI(或其它)混匀,避光、反应;

  荧光显微镜、激光共聚焦或流式细胞仪观察和检测。



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